雞卵泡顆粒細(xì)胞的保存方法

        細(xì)胞簡(jiǎn)介：

        雞卵泡顆粒細(xì)胞分離自 PMSG 誘導(dǎo)后 3 天的雞卵巢組織，顆粒細(xì)胞是卵巢的主要功能細(xì)胞，其增殖與分化直接影響著卵泡的生長(zhǎng)啟動(dòng)、發(fā)育、排卵、黃體形成以及甾體激素分泌等卵巢功能活動(dòng)。細(xì)胞形狀呈圓形或橢圓形。本公司生產(chǎn)的雞卵泡顆粒細(xì)胞采用機(jī)械分離法制備而來，細(xì)胞總量約為 5×105 個(gè)/瓶，細(xì)胞純度可達(dá) 80%以上，且不含有 HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

        一、使用方法

        客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1.取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2.待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3.細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%胰蛋白酶消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

        二、注意事項(xiàng)

1.培養(yǎng)基于生化培養(yǎng)箱4℃條件下可保存 3-6 個(gè)月。

2.在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請(qǐng)注意保持無菌操作。

3.傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。

4.該細(xì)胞只可用于科研。