菌類多糖提取

       今天喆圖小編來講講金針菇多糖提取所需試劑儀器設(shè)備：蒸餾水、纖維素酶、無水乙醇、、正丁醇、氯化鈉、三氯一酸、氫氧化鈉 、鼓風(fēng)干燥箱、濃縮裝置、離心機(jī)、真空烘箱、冰箱、色譜柱、冷凍干燥機(jī) 

       操作過程：原料-預(yù)處理--酶解--浸提--濃縮--醇析--脫蛋白--干燥--多糖純品--精制--多糖精品 
       （1）原料 ：新鮮金針菇   
       （2）預(yù)處理：新鮮金針菇65°C放入鼓風(fēng)干燥箱烘干6h制成干品，將金針菇子實(shí)體干品粉碎，粉碎粒度為3--5mm，粉碎后裝入容器中加入2倍質(zhì)量的水，在90-95°C條件下加熱處理10-15min，得到金針菇子實(shí)體勻漿 
       （3）酶解 ：向勻漿中加入0.15%的纖維素酶以破壞金針菇子實(shí)體的細(xì)胞壁，使多糖釋放出，來，酶解溫度40°C ,ph為4,5時(shí)間為3h 
       （4）浸提：向容器中加入20倍樣品質(zhì)量的水，在100°C，ph6.5的條件下浸提1h，過濾并收集濾液 
       （5）濃縮 ：將濾液在40°C壓力0.2MPa條件下濃縮至原體積是我1/3 
       （6）醇析 ：向濃縮液中加入無水乙醇至乙醇含量為70%，可以看到有沉淀析出，靜置一段時(shí)間至沉淀*析出，在離心分離，收集沉淀，并于鼓風(fēng)干燥箱中烘干得到多糖粗品 
       （7）純化脫蛋白質(zhì) ： 將多糖粗品按樣品與氯方-正丁醇（氯方-正丁醇之比為1:0.2）之比為1:0.25復(fù)溶并進(jìn)行充分震蕩，可將游離蛋白變性成為不容性物質(zhì)，經(jīng)離心分離去除，此過程通常反復(fù)進(jìn)行5-8次，每次震蕩30min，才能很好的去除蛋白質(zhì)，除蛋白后的多糖溶液進(jìn)行真空干燥，即可得到純多糖產(chǎn)品 
       （8）精制：粗多糖粉末溶于0.1mol/L的氫氧化鈉溶液中，至于5-8°C低溫保存箱冷置12h,離心棄去沉淀、濾液加入40%的三氯一酸使之達(dá)到8%的含量，再置于低溫冰箱中5-8°C冷置12h離心，將沉淀加入0.1mol/L氯化鈉溶液洗脫分離，用硫酸-苯酚跟蹤檢測(cè)，收集（收率約為45%）多糖組分的母液，再取母液以0.1mol/L的氫氧化鈉溶液中和至ph6.5-7.0，然后將上述洗脫液適當(dāng)濃縮，蒸餾透析后，在用色譜分離純化。用0.1mol/L的氫氧化鈉溶液洗脫。收集洗脫液的糖樣 

       （9）精品  :  將此糖樣經(jīng)減壓濃縮后，冷凍干燥得到的白色粉末狀金針菇多糖精品。

         以上內(nèi)容僅供參考！